在光學(xué)顯微鏡下精確測(cè)量微生物的大小,主要依賴(lài)于目鏡測(cè)微尺這一工具,并遵循一系列嚴(yán)謹(jǐn)?shù)牟僮鞑襟E。以下是詳細(xì)的測(cè)量過(guò)程:
一、工具準(zhǔn)備與校正
目鏡測(cè)微尺:這是一種專(zhuān)門(mén)用于顯微鏡測(cè)量的工具,通常安裝在顯微鏡的目鏡上。
鏡臺(tái)測(cè)微尺:這是一個(gè)已知長(zhǎng)度的標(biāo)準(zhǔn)尺,用于校正目鏡測(cè)微尺。
校正步驟:
將鏡臺(tái)測(cè)微尺放在顯微鏡的載物臺(tái)上,并使其刻度朝上。
將目鏡測(cè)微尺放入目鏡內(nèi),并調(diào)整顯微鏡,使目鏡測(cè)微尺與鏡臺(tái)測(cè)微尺的刻度線重合。
觀察并記錄鏡臺(tái)測(cè)微尺上某一長(zhǎng)度(如10格)在目鏡測(cè)微尺上對(duì)應(yīng)的格數(shù)。
根據(jù)已知鏡臺(tái)測(cè)微尺的長(zhǎng)度和目鏡測(cè)微尺上的格數(shù),計(jì)算出目鏡測(cè)微尺每格所代表的實(shí)際長(zhǎng)度,即校正值。這個(gè)過(guò)程需要在低倍鏡、高倍鏡及油鏡下分別進(jìn)行,因?yàn)椴煌糯蟊稊?shù)下,目鏡測(cè)微尺的每格長(zhǎng)度會(huì)有所不同。
二、微生物樣本制備
取樣:從待測(cè)微生物群體中隨機(jī)選取一定數(shù)量的樣本。
制片:將樣本制成水浸片或染色涂片,并放置在顯微鏡的載物臺(tái)上。
三、測(cè)量與記錄
調(diào)焦與定位:使用顯微鏡的低倍鏡先找到微生物的視野,然后逐漸轉(zhuǎn)換到高倍鏡或油鏡,并調(diào)整焦距使微生物圖像清晰。
測(cè)量:使用目鏡測(cè)微尺測(cè)量微生物的寬度和長(zhǎng)度。在測(cè)量時(shí),應(yīng)注意微生物的形態(tài)可能因放大倍數(shù)而有所變化,因此需要在同一放大倍數(shù)下進(jìn)行測(cè)量。
記錄:記錄每個(gè)微生物的寬度和長(zhǎng)度所對(duì)應(yīng)的目鏡測(cè)微尺格數(shù),并乘以相應(yīng)的校正值,得到微生物的實(shí)際寬度和長(zhǎng)度。
重復(fù)測(cè)量:為了提高測(cè)量的準(zhǔn)確性,通常需要測(cè)量多個(gè)(如10個(gè))微生物樣本,并計(jì)算其平均值作為最終結(jié)果。
四、注意事項(xiàng)
在測(cè)量過(guò)程中,應(yīng)確保顯微鏡的放大倍數(shù)、焦距等參數(shù)保持不變,以避免測(cè)量誤差。
對(duì)于形態(tài)不規(guī)則的微生物,應(yīng)選擇合適的測(cè)量方法和參數(shù)進(jìn)行描述和記錄。
在使用油鏡時(shí),應(yīng)注意鏡頭的保護(hù)和清潔,避免鏡頭與玻片相撞或污染。
通過(guò)上述步驟,可以在光學(xué)顯微鏡下精確測(cè)量微生物的大小,為微生物學(xué)研究和應(yīng)用提供可靠的數(shù)據(jù)支持。