光學顯微鏡的重要參數(shù)主要包括以下幾個方面：

1. 放大倍數(shù)

定義：物體經(jīng)過顯微鏡成像后放大的比例。

計算公式：總放大倍數(shù) = 目鏡放大倍數(shù) × 物鏡放大倍數(shù)。

影響因素：雖然放大倍數(shù)越高，觀察到的物體細節(jié)就越多，但過高的放大倍數(shù)也可能造成圖像失真或模糊。因此，使用時應根據(jù)觀察需求和樣本特性選擇合適的放大倍數(shù)。

2. 數(shù)值孔徑（NA）

定義：一個無量綱數(shù)，用于衡量光學系統(tǒng)收集光的能力，具體描述了透鏡收光錐角的大小。

計算公式：NA = n × sin(α/2)，其中n為透鏡與被檢物體之間介質(zhì)的折射率，α為孔徑角（透鏡光軸上的物體點與物鏡前透鏡的有效直徑所形成的角度）的一半。

影響因素：物鏡結構與設計、介質(zhì)折射率、光源波長、光學特性以及觀察對象的形狀大小等都會影響數(shù)值孔徑的大小。數(shù)值孔徑越大，顯微鏡的分辨率、對比度和亮度等性能就越好。

3. 分辨率

定義：顯微鏡能清晰區(qū)分的兩個物點的Z小間距，又稱鑒別率，它反映了顯微鏡對細節(jié)進行區(qū)分的能力。

計算公式：σ = λ/NA，其中σ為Z小分辨距離，λ為光線的波長，NA為物鏡的數(shù)值孔徑。

影響因素：分辨率受到物鏡的數(shù)值孔徑和照明光源的波長的影響。要提高分辨率，可以采取降低波長λ值、增大介質(zhì)n值以提高NA值、增大孔徑角α值以提高NA值等措施。

4. 視場

定義：從顯微鏡中能看到的圓形范圍，也叫視野。它代表著顯微鏡能夠觀察到的Z大范圍。

影響因素：視場數(shù)（FN）越大，觀察范圍越廣。視場數(shù)與目鏡和物鏡的放大倍數(shù)息息相關，目鏡和物鏡放大倍數(shù)越大，視場數(shù)通常越小。因此，需根據(jù)目鏡和物鏡的組合來選擇合適的視場數(shù)，以獲得Z佳觀察效果。同時，分辨率與視場數(shù)之間存在平衡關系，選擇時應以保證分辨率為準。

5. 景深

定義：在顯微鏡觀察和拍攝樣品時，從對準焦點的位置開始，改變物鏡與樣品表面距離時，對焦能保持清晰的范圍。

影響因素：景深大小決定了顯微鏡觀察時，能在多大范圍內(nèi)保持圖像的清晰度。景深大時，可以看到被檢物體的全層；景深小時，則只能看到被檢物體的一薄層。景深與總放大倍數(shù)及物鏡的數(shù)值孔徑成反比。

6. 工作距離

定義：試樣調(diào)準焦點時，物鏡前緣與試樣表面（或蓋玻片頂面）的距離。

影響因素：工作距離的大小主要取決于物鏡的參數(shù)。在選擇物鏡時，需要考慮工作距離的需求，以確保顯微鏡能夠滿足特定的觀察要求。長工作距離物鏡焦距大于普通物鏡，專為液態(tài)材料、液晶、組織培養(yǎng)等鏡檢設計，允許在不接觸容器的情況下觀察和研究樣本。

這些參數(shù)在使用光學顯微鏡時都非常重要，它們之間相互聯(lián)系又相互制約。因此，在實際應用中，需要根據(jù)具體的觀察需求和樣本特性來協(xié)調(diào)這些參數(shù)的關系，以獲得Z佳的觀察效果。